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WB免 yi 杂交与显色操作过程
日期:2025-05-03 01:48
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摘要:
Western Blot(WB)免yi 杂交与显色操作过程:
1.用25 ml TBS 洗膜5min,室温,摇动。
2.置膜于25 ml 封闭缓冲液中1h, 室温,摇动。
3.15ml TBS/T洗3次(5 min/T)。
4.加入合适稀释度的一抗,室温孵育1-2h或 4°C过夜,缓慢摇动。
5.15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。
6.加入合适稀释度的碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗,室温孵育1h,缓慢摇动。
7.15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。
8.15 ml TBS洗1次。
9.蛋白检测(显色法或发光...
Western Blot(WB)免yi 杂交与显色操作过程:
1.用25 ml TBS 洗膜5min,室温,摇动。
2.置膜于25 ml 封闭缓冲液中1h, 室温,摇动。
3.15ml TBS/T洗3次(5 min/T)。
4.加入合适稀释度的一抗,室温孵育1-2h或
5.15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。
6.加入合适稀释度的碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗,室温孵育1h,缓慢摇动。
7.15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。
8.15 ml TBS洗1次。
9.蛋白检测(显色法或发光法,按相应试剂说明操作)。