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ELISAS试验洗涤参数及次数
日期:2025-05-03 01:50
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摘要:
ELISAS试验洗涤参数及次数:
1、洗涤参数:
第1个主要的参数是洗涤量。自动洗板机会分配洗涤液。如果你之前遭遇过高背景,那么不要犹豫,将洗涤量调为高, zui好是比包被体积更高。太少的洗涤液会让一部分分析表面洗涤不到,从而明显增加背景。所有反应孔的洗涤量必须相同。
ELISA板的**商通常会在试剂盒的使用手册中列出包被量。行业中通常使用的包被量是200µl。如果你的试剂盒也是这样,那么**商可能会建议使用300µl洗涤液进行洗涤,以便清洁整个反应孔的壁...
ELISAS试验洗涤参数及次数:
1、洗涤参数:
第1个主要的参数是洗涤量。自动洗板机会分配洗涤液。如果你之前遭遇过高背景,那么不要犹豫,将洗涤量调为高, zui好是比包被体积更高。太少的洗涤液会让一部分分析表面洗涤不到,从而明显增加背景。所有反应孔的洗涤量必须相同。
ELISA板的**商通常会在试剂盒的使用手册中列出包被量。行业中通常使用的包被量是200µl。如果你的试剂盒也是这样,那么**商可能会建议使用300µl洗涤液进行洗涤,以便清洁整个反应孔的壁。一般来说,洗涤量越高,则孵育步骤残留的抗体或抗原量就越少。
2、洗涤次数:
第2个影响洗涤效果的主要参数是洗涤循环的量。当然,洗涤次数越多,背景越低。然而,太多次的洗涤会降低信号强度,使其难以测定。通常的做法是在每次抗体或抗原孵育后重复洗涤三次。不过,ELISA板的**商会对洗涤次数提出建议。一般而言,**商包被平板需要的洗涤次数比用户包被的平板要少。对于用户包被的ELISA板,必须优化洗涤次数。
控制洗涤量和洗涤次数的另一种方法是加入过量的洗涤液。一般来说,96孔板的每个孔能容纳330至460 µl。不过,有些自动化洗板机可设置程序,分配远远超出这个量的洗涤液,比如1 ml。它是如何做到的呢?其实很简单,就是在分液的同时打开吸液功能。换句话说,随着分液器分配更多的液体,抽吸器也将液体吸出。这种技术能增加洗涤量,但不会溢出到其他孔中。