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ELISA缓冲液的PH大于蛋白的PI包被分析
日期：2025-05-03 04:13
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摘要：
蛋白和聚苯乙烯板子结合的详细过程目前上不是很明了，目前认为是通过静电吸附在板子上的，而聚苯乙烯板子一般在出厂前也要经过强电厂处理以提高吸附能力！肯定和蛋白的带电情况有关，包被缓冲液并不一定都是PH9.6 的CB，不同的蛋白选用不同的包被缓冲液可以得佳的包被效果，从上面可以看出和蛋白的带电情况有明显的相关性！
为什么缓冲液的PH要大于包被蛋白的PI，原因有两点：
一是因为蛋白质与酶标板的结合主要是靠疏水作用的物理吸附。而缓冲液的PH略大于包被蛋白的PI，有利于蛋白质...
蛋白和聚苯乙烯板子结合的详细过程目前上不是很明了，目前认为是通过静电吸附在板子上的，而聚苯乙烯板子一般在出厂前也要经过强电厂处理以提高吸附能力！肯定和蛋白的带电情况有关，包被缓冲液并不一定都是PH9.6 的CB，不同的蛋白选用不同的包被缓冲液可以得佳的包被效果，从上面可以看出和蛋白的带电情况有明显的相关性！
为什么缓冲液的PH要大于包被蛋白的PI，原因有两点：
一是因为蛋白质与酶标板的结合主要是靠疏水作用的物理吸附。而缓冲液的PH略大于包被蛋白的PI，有利于蛋白质疏水键的适当暴露。
二是因为酶标板聚苯乙烯表面暴露的主要是C－H键，而缓冲液的PH略大于包被蛋白的PI，可以使蛋白质带上负电荷，有利于蛋白质与酶标板的牢固结合，提高包被效率。所以我们常用的包被液体多位PH9.6的碳酸氢钠缓冲液，当然对PI低的蛋白质也有使用PH7.4的包被液的情况。
（蛋白质等电点的英文缩写是PI。 蛋白质在溶液中有两性电离现象。假设某一溶液中含有一种蛋白质。当PI=PH时该蛋白质极性基团解离的正负离子数相等，净电荷为0，此时的该溶液的是PH值是该蛋白质的PI值。某一蛋白质的PI大小是特定的,与该蛋白质结构有关，而与环境PH无关。 在某一PH溶液中当PH＞PI时该蛋白质带负电荷。反之PH＜PI时该蛋白质带正电荷。PH=PI时该蛋白质不带电荷 人体内PH=7.4；而体内大部分蛋白质的 PI＜6； 所以人体内大部分蛋白质带负电荷）