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PCR实验非特异性条带扩增或条带出现拖尾现象解决方法
日期：2025-05-03 01:56
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摘要：
PCR实验非特异性条带扩增或者条带出现拖尾现象解决方法
1、当引物特异性差或引物形成二聚体时，可重新设计引物或者使用巣式PCR
2、若模板或引物浓度过高，可适当降低模板或引物浓度
3、酶量过多，则适当减少酶量
4、Mg2+浓度偏高，则降低镁离子浓度
5、退火温度偏低，适当提高退火温度或使用二阶段温度法（94变性，65左右退火与延伸）
6、循环次数过多，不仅会降低扩增效率，且会使错误掺入率增加，因此需要减少循环次数。
PCR实验非特异性条带扩增或者条带出现拖尾现象解决方法
1、当引物特异性差或引物形成二聚体时，可重新设计引物或者使用巣式PCR
2、若模板或引物浓度过高，可适当降低模板或引物浓度
3、酶量过多，则适当减少酶量
4、Mg2+浓度偏高，则降低镁离子浓度
5、退火温度偏低，适当提高退火温度或使用二阶段温度法（94变性，65左右退火与延伸）
6、循环次数过多，不仅会降低扩增效率，且会使错误掺入率增加，因此需要减少循环次数。