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操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
产品名称 |
英文名称 |
货号 |
SCRN3人分离蛋白3ELISA试剂盒说明书 |
Human Secernin 3(SCRN3)ELISA Kit |
PH102116 |
优势特点:产品仅用于科研
1.高效、灵敏、特异的抗体;
2.稳定的重复性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相载体;
4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型;
5.节省实验经费。
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
盐酸乌拉地尔(标准品)Urapidil 质量规格:含量测定 英文名称RatHistoneDeacetylaseELISAKit大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)规格:96T/48T 人二级组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
盐酸氟桂利嗪(标准品)Flunarizine 质量规格:含量测定 钙离子膜通道钙交换体(NCX/内质网)功能荧光检测试剂盒20 小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)试剂盒 Mouse P-Selectin ELISA kit
TFA-aa-dUTFA-aa-dU质量规格:>98%,BR ELISAKitIegrinαⅤβ3人整合素αⅤβ3规格:48T/96T 硒蛋白P(SEPP1)ELISA试剂盒 ,英文名: SEPP1 ELISA Kit
5-尿苷5-Iodo-Uridine质量规格:>99%,BR 小鼠连环蛋白β1(CTNNβ1)ELISA试剂盒 ,英文名: CTNNβ1 ELISA Kit
Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA试剂盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒规格:96T/48T
十二烷基苯磺酸钠(>95%,Tech Grade)
dodecylbenzenesulfonate质量规格:>95%,Tech Grade 小鼠血纤蛋白原γ链(FGG)ELISA试剂盒 ,英文名: FGG ELISA Kit ELISAKitFFA小鼠游离脂肪酸规格:48T/96T
硅酸钠九水(>98%,BR) silicate hydrate质量规格:>98%,BR 小鼠细胞膜表面球蛋白(SmIg)ELISA检测试剂盒MouseSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIgELISAKit 96T/48T Humancoloncancer-specificaigen-2,CCSA-2ELISAKit人大肠癌专一抗原2(CCSA-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)Bluo-Gal质量规格:>98%,BR 人基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)试剂盒 Human maix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit 人溶菌酶(LZM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
1酸氢二钠二水Di hydrogen phosphate
dihydrate质量规格:>99%,BR RatcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 小鼠叶酸(FA)试剂盒 Mouse Folic acid,FA ELISA Kit
利克飞龙Licofelone质量规格:>99%,BR Ratmacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAKit大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒规格:96T/48T 人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
灵芝烯酸CGanoderenic acid C质量规格:>95.0%(HPLC) DEPC水500毫升 小鼠酸激酶(PK)试剂盒 Mouse pyruvate kinase,PK ELISA Kit
生物胞素Biocytin质量规格:>98%,进分 MouseOsteopoin,OPNELISA试剂盒小鼠骨桥素(OPN)ELISA试剂盒规格:96T/48T 雄(ASD)ELISA试剂盒 ,英文名: ASD ELISA Kit
PU-H71PUH71质量规格:>98%,HSP90抑制剂 小鼠内脂素(VF)ELISA试剂盒 ,英文名: VF ELISA Kit MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISA试剂盒小鼠糖原1酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
SCRN3人分离蛋白3ELISA试剂盒说明书服务:
我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。