产品名称：USP8人泛素特异性肽酶8ELISA试剂盒说明书

操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

优势特点：产品仅用于科研
1.高效、灵敏、特异的抗体；
2.稳定的重复性和可靠性；
3.吸附性能好，空白值低，孔低透明度高的固相载体；
4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型；
5.节省实验经费。 

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
盐酸拉贝洛尔（标准品）质量规格：含量测定Labetalol   RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISA试剂盒兔纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒规格：96T/48T  大鼠γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)试剂盒 Rat γ glamylcysteine syhetase,γ-GCS ELISA kit

水杨酰胺（标准品）质量规格：HPLC法含量测定Salicylamide  小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  CLIAKitfoAb(HumanParathyroidHormoneRelatedProtein)ELISAKit人甲状腺素抗体规格：48T/96T

非普拉宗（标准品）质量规格：UV法溶出度检查Feprazone  Rat growth factor (GH) ELISA Kit 大鼠生长因子(GH)ELISA试剂盒  人体RASSF1A基因甲基化检测试剂盒20

茴三硫;胆维他质量规格：>99%,BRAnethole trithione  HumanpreptinELISAKit 人preptinELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  ELISAKitLMA人抗肝细胞膜抗体规格：48T/96T
三(2-氯乙基)1酸酯(>97.0%(GC))Tris(2-chloroethyl) Phosphate质量规格：>97.0%(GC)  小鼠铁调素(Hepc)ELISA试剂盒 ，英文名： Hepc ELISA Kit  ELISAKitAb小鼠抗促甲状腺素受体抗体规格：48T/96T

1酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯(>95.0%(GC))Tris(1,3-dichloro-2-propyl) Phosphate质量规格：>95.0%(GC)  小鼠白介素13(IL-13)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin13,IL-13ELISAKit 96T/48T  Humanai-cenolandcenosomeaibody，ACAELISAKit人抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1酸三(2-正丁氧乙基)酯(>95.0%(GC))Tris(2-butoxyethyl) Phosphate质量规格：>95.0%(GC)  人瓜氨酸试剂盒 Human Ciulline ELISA Kit  人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

1酸2-乙基己基二苯酯(>90.0%(GC))2-Ethylhexyl Diphenyl Phosphate质量规格：>90.0%(GC)  RatFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit大鼠凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒规格：96T/48T  小鼠1脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)试剂盒 Mouse phosphatidylinositol aibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
克林沙星盐酸盐质量规格：美国进口Clinafloxacin   英文名称RatCCL3ELISAKit大鼠CCL3规格：96T/48T  大鼠(NO)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

外消旋西他列汀质量规格：美国进口rac-Sitagliptin  口香糖阿糖醇比色法定量检测试剂盒20  人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)试剂盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris aggliin 2,AFP-L2 ELISA Kit

1酸西他列汀质量规格：美国进口Sitagliptin Phosphate  ELISAKitCLA人皮肤细胞相关抗原规格：48T/96T  硫氧还蛋白氧化还原酶(xR)测试盒 可见分光光度法 50管/48样

西他列汀N-硫酸盐质量规格：美国进口Sitagliptin N-Sulfate  小鼠X-射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)ELISA试剂盒 ，英文名： XRCC5 ELISA Kit  Ratmelanocyteaibody,MCAbELISA试剂盒大鼠色素细胞抗体(MCAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T
注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。

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