产品名称：PON1人对氧磷酶1免费代测试剂盒

操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

优势特点：产品仅用于科研
1.高效、灵敏、特异的抗体；
2.稳定的重复性和可靠性；
3.吸附性能好，空白值低，孔低透明度高的固相载体；
4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型；
5.节省实验经费。 

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
盐酸吡哆胺(>98%,BC )质量规格：>98%,BC Pyridoxamine, di  rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISA试剂盒兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒规格：96T/48T  人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒 ，英文名： PA-IgG/M/A ELISA Kit

水杨酸钠(>99%,USP)质量规格：>99%,USP salicylate  小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒 ，英文名： hs-CRP ELISA Kit  RatFractalkine/CX3CL1ELISA试剂盒大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3-(环己氨基 )-1-丙磺酸钠(分子生物学级)质量规格：>99%,分子生物学级CAPS,  salt  大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA检测试剂盒RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit 96T/48T  Humaneosinophilcationicprotein,ECPELISA试剂盒人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

稻瘟灵（标准品）质量规格：分析标准品,97.5% Isoprothiolane  人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)试剂盒 Human amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T  Humanhepatocytegrowthfactor，HGFELISAKit人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
炔雌醇17-β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Ethynyl Estradiol 17-β-D-Glucuronide  Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人视黄酸诱导基因/RIG-1样受体(RLR)ELISA试剂盒规格：96T/48T  谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)测试盒 GR法 50管/48样

炔雌醇3-醋酸盐质量规格：美国进口Ethynyl Estradiol 3-Acetate  小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒 ，英文名： P-Selectin/CD62P ELISA Kit  Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISA试剂盒大鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA试剂盒规格：96T/48T

β-雌二醇 3-(β-D-葡萄糖苷酸)钠盐质量规格：美国进口β-Estradiol 3-(β-D-glucuronide)  salt  大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA检测试剂盒Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 96T/48T  HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA试剂盒人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-羟基炔雌醇质量规格：美国进口2-Hydroxy Ethynyl Estradiol  人FOS 样抗原2(FOSL2)试剂盒 Human FOSL2 ELISA Kit  Humanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
聚乙二醇10000PEG 10000质量规格：分子量9,000~11,000  Humanangiotensinogen,aGTELISA试剂盒人血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒规格：96T/48T  人促卵泡素(FSH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

DL-苹果酸DL-Malic acid质量规格：>98%,BR  植物根瘤原生质细胞分离试剂盒5  小鼠17-酮类(17-KS)试剂盒 Mouse 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit

D-酪氨酸D-Tyrosine质量规格：>98%,BR  Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒规格：96T/48T  糖原1酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒 ，英文名： GP-II ELISA Kit

D-组氨酸D-Histidine质量规格：>98%,BR  小鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒 ，英文名： ANA ELISA Kit  Mousesmallnuclearribonucleoprotein,sNP/SmELISA试剂盒小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(sNP/Sm)ELISA试剂盒规格：96T/48T
注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。

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