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操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
产品名称 |
英文名称 |
货号 |
YY1人YY1转录因子进口检测试剂盒 |
Human YY1 Transcription Factor(YY1)ELISA Kit |
PH102850 |
优势特点:产品仅用于科研
1.高效、灵敏、特异的抗体;
2.稳定的重复性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相载体;
4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型;
5.节省实验经费。
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
氟胞嘧啶/5-氟胞嘧啶(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Flucytosine ELISAKitaFGF-1人酸性成纤维细胞生长因子1规格:48T/96T 可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒 ,英文名: B7-2/sCD86 ELISA Kit
非对称二甲基精氨酸质量规格:>98%,盐酸盐形式,美国进口ADMA 小鼠1酸核糖基转移酶1(HP1)ELISA试剂盒 ,英文名: HP1 ELISA Kit RatEndostatin,ESELISA试剂盒大鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N'-硝基-D-精氨酸质量规格:0.98N'-Nitro-D-arginine 人游离血红蛋白(f-Hb)ELISA检测试剂盒Humanfreehaemoglobin,f-HbELISAKit 96T/48T HumanDickkopf1,DKK1ELISA试剂盒人Dickkopf1(DKK1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
D-天冬酰胺,一水质量规格:0.99D-Asparagine
monohydrate 大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒 Rat ovalbumin specific
IgE,OVA sIgE ELISA Kit
Humanheafattyacidbindingprotein,h-FABPELISAKit人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
福辛普利Fosinopril质量规格:美国进口 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA检测试剂盒HumanOrexinB,OX-BELISAKit
96T/48T
Humanai-calmodulinspecificaibody,CaM-abELISA试剂盒人抗钙调素特异抗体(CAM-ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
(R)-盐酸氮卓斯汀(R)-Azelastine 质量规格:美国进口 大鼠维生素C(VC)试剂盒 Rat Vitamin C,VC ELISA Kit humanBeta-Endorphin,β-EPELISAKit人β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
9-去氧-9a-氮杂-同型红霉素A 去甲阿奇霉素9-Deoxo-9a-aza-9a-homo Erythromycin A Desmethyl Azithromycin质量规格:美国进口 英文名称RatMotilinELISAKit大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
阿奇霉素Azithromycin质量规格:美国进口 赫特法病毒DNA化试剂盒10/20
兔子白介素1α(IL-1α)试剂盒 Rabbit Ierleukin 1α,IL-1α ELISA Kit
氟芬那酸,氟灭酸(标准品)Flufenamic acid质量规格:HPLC≥99%,标准品 Mouselymphotactin,Lptn/LTNELISA试剂盒小鼠细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 延伸蛋白A(EloA)ELISA试剂盒 ,英文名: EloA ELISA Kit
氟马西尼/氟马泽尼Flumazenil质量规格:>99%,USP31 小鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒 ,英文名: fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISA试剂盒小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氟马西尼/氟马泽尼(标准品)Flumazenil质量规格:>99%,标准品 小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA检测试剂盒MouseProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 96T/48T ELISAKitIL-10小鼠白介素10规格:48T/96T
盐酸氟西汀Fluoxetine 质量规格:>99%,BR 人钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)试剂盒 Human CAST ELISA kit Elisa伪狂犬病毒gE2.0抗体ELISA试剂盒5*96孔5*96孔
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
YY1人YY1转录因子进口检测试剂盒服务:
我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。