产品名称：RTKN人Rhotekin蛋白进口检测试剂盒

服务：
      我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。

优势特点：产品仅用于科研
1.高效、灵敏、特异的抗体；
2.稳定的重复性和可靠性；
3.吸附性能好，空白值低，孔低透明度高的固相载体；
4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型；
5.节省实验经费。 

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
二甲基亚砜(色谱级)  Dimethyl sulfoxide  质量规格：for HPLC, ≥99.7% 酵母菌CSM-△LEU/△P培养基100毫升

N,N-二甲基乙酰胺(色谱级)  N-N-Dimethylacetamide  质量规格：for HPLC,≥99.8%(GC) 酵母菌DOBA培养基100毫升

甘油(色谱级)  Glycerol in water for HPLC verification  质量规格：for HPLC,≥99.5% 酵母菌DOB培养基100毫升

十二烷基基氯化胺[离子对色谱级]  IPC-DTMA-Cl  质量规格：离子对色谱用试剂 酵母菌SD-ADE培养基100毫升

乙酸二丁基铵(约0.5mol/L的水溶液)[离子对色谱级]  IPC-DBAA (ca. 0.5mol/L in Water)  质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂 酵母菌SD-ADE培养基100毫升

乙酸二丙基铵(约0.5mol/L的水溶液)[离子对色谱级]  IPC-DPAA (ca. 0.5mol/L in Water)  质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂 酵母菌SD-GAL/RAF培养基100毫升

乙酸二戊基铵(约0.5mol/L水溶液)[离子对色谱级]  IPC-DAAA (ca. 0.5mol/L in Water)  质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂 酵母菌SD-G培养基100毫升

乙酸二己基铵(约0.5mol/L的水溶液)[离子对色谱级]  IPC-DHAA (ca. 0.5mol/L in Water)  质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂 酵母菌SD-HIS培养基100毫升

1-辛烷磺酸钠[离子对色谱级]  IPC-ALKS-8  质量规格：离子对色谱用试剂 酵母菌SD-LEU/P/HIS培养基100毫升

1-壬烷磺酸钠[离子对色谱级]  IPC-ALKS-9  质量规格：离子对色谱用试剂 酵母菌SD-LEU/P培养基100毫升
EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 氯化钠 chloride质量规格：>99%,AR

非洲绿猴肾细胞;CV-1盐酸胍Guanidine 质量规格：>99%,分子生物学级

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌细胞，QG-56细胞 E14细胞，129小鼠ES细胞侧金盏花醇,阿东糖醇,核糖醇Adonitol质量规格：>97.0%(GC) ,进口

KM3, 人多发性骨髓瘤细胞 Human酵母浸粉；酵母粉Yeast extract质量规格：FMB Grade

CLEC4D Others Human 人 CLEC4D / CLECSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 核糖核酸酶 A 溶液RNase A Solution质量规格：分子生物学级,>60 U/mg,10 mg/ml
小鼠可溶性elisa试剂盒   小鼠可溶性试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠可溶性试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠可溶性试剂盒、小鼠可溶性eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Ethyl2-((tert-butoxycarbonyl)amino)-3-nitrobenzoate  136285-65-9  中文名：  分子式：C14H18N2O6 

小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Methyltestosterone  中文名：甲基  分子式：C20H30O2 

小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Dihydrotanshinone I  87205-99-0  中文名：  分子式：C18H14O3 

小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Ethopabate  中文名：乙氧酰胺苯甲酯  分子式：C12H15NO4  度：99.0%

小鼠可溶性 P- 选择素 (mouse sP-Selectin/ sCD62P)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D  Estrone  中文名：雌酮  分子式：C18H22O2  度：99.0%
操作流程：
RTKN人Rhotekin蛋白进口检测试剂盒（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。