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操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
产品名称 |
英文名称 |
货号 |
RPH3A人Rab亲和蛋白3A免费代测试剂盒 |
Human Rabphilin 3A(RPH3A)ELISA Kit |
PH103055 |
优势特点:产品仅用于科研
1.高效、灵敏、特异的抗体;
2.稳定的重复性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相载体;
4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型;
5.节省实验经费。
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
反式白藜芦醇4'-O-β-D-葡萄糖苷酸 trans Resveratrol 4'-O-β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口 英文名称MouseAndrostenedioneELISAKit小鼠雄烯二同(ASD)规格:96T/48T
反式白藜芦醇3-O-β-D-葡萄糖苷酸 trans Resveratrol 3-O-β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口 英文名称MouseAngiogeninELISAKit小鼠血管生长素(Angiogenin)规格:96T/48T
利巴韦林5'-三钠盐 Ribavirin 5'-Triphosphate salt 质量规格:美国进口 英文名称MouseAngiopoietin-1(ANG-1)ELISAKit小鼠血管**素-1(ANG-1)规格:96T/48T
利巴韦林5'-二锂盐 Ribavirin 5'-Diphosphate Lithium Salt 质量规格:美国进口 英文名称MouseAngiopoietin-2ELISAKit小鼠血管**素-2(ANG-2)规格:96T/48T
α-利巴韦林(利巴韦林杂质B) α-Ribavirin (Ribavirin Impurity B) 质量规格:美国进口 英文名称MouseAngiotensinIconveingenzymeELISAKit小鼠血管紧张素I转化酶(ACE)规格:96T/48T
Iso利巴韦林(利巴韦林杂质G) Iso Ribavirin (Ribavirin Impurity G) 质量规格:美国进口 英文名称MouseangiotensinogenELISAKit小鼠血管紧张素原(aGT)规格:96T/48T
利巴韦林5'-单二锂盐 Ribavirin 5'-Monophosphate, Dilithium Salt 质量规格:美国进口 英文名称MouseangiotensionⅠELISAKit小鼠血管紧张素I(AngI)规格:96T/48T
1-β-D-呋核亚硝尿-1,2,4-三唑-3-羧酸甲酯 1-β-D-Ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxylic Acid Methyl Ester 质量规格:美国进口 英文名称MouseangiotensionIIELISAKit小鼠血管紧张素II(ANGII)规格:96T/48T
3-羧氨基利巴韦林盐酸盐 Viramidine 质量规格:美国进口 英文名称MouseansferrieceptorELISAKit小鼠转铁蛋白受体(TFR)规格:96T/48T
25-O-去乙酰基利福布汀 25-O-Deacetyl Rifabutin 质量规格:美国进口 英文名称MouseansformingGrowthfactorβ1ELISAkit小鼠转化生长因子β1(TGFβ1)规格:96T/48T
RWPE1(人前列腺上皮细胞) 5×106cells/瓶×2马来酸依那普利Enalapril Maleate质量规格:>98.5%,USP
Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kit马来酸依那普利(标准品)Enalapril Maleate质量规格:HPLC>99%,标准品
人雪旺细胞总RNAHSC NA氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶5-Fluorouracil质量规格:>98%,BR,可用于细胞培养
小鼠小神经胶质细胞(MM)(5×105)氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶(标准品)5-Fluorouracil质量规格:HPLC>98%,标准品
黄胸鼠肺成纤维细胞;YCR琥珀酸舒马曲普坦Sumatriptan succinate 质量规格:>98%,BR
小鼠卵泡休止素 英文名称:
Mouse Follistatin 规格: 48T/96T
英文缩写: FST
N-Benzoyl-L-glutamic acid 6094-36-6 中文名:N-苯甲酰-L-谷氨酸
分子式:C12H13NO5 度:98.0%
小鼠瘤病18(HPV-18)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Bromhexine 611-75-6 中文名:盐酸溴己新 分子式:C14H21Br2ClN2
小鼠瘤病16(HPV-16)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Brinzolamide 中文名:布林佐胺 分子式:C12H21N3O5S3 度:98.0%
小鼠硫氧化还原蛋白(x)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Febuxostat 中文名:非布索坦 分子式:C16H16N2O3S
小鼠硫氧化还原蛋白(x)ELISAKit ELISA.
96T/48T Falcarinol 中文名:
分子式:C17H24O
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.RPH3A人Rab亲和蛋白3A免费代测试剂盒 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
服务:
我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。