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  • 产品名称:MDCK(NBL-2)细胞

  • 产品型号: BH-0109551
  • 产品**:派瑞曼
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简单介绍:
MDCK(NBL-2)细胞来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
详情介绍:

细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等; 
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

产品名称

MDCK(NBL-2)细胞

规格

T25

货号

BH-0109551

产品详细 马-达二氏犬肾细胞系;MDCK(NBL-2)
形态特性 上皮样;多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 1958年,MadinSH和DarbyNB从表观正常的成年雌性科克猎犬的肾建立了MDCK细胞株。角蛋白阳性。该细胞曾被用于研究β淀粉前体蛋白的形成及其蛋白水解产物的分类
培养条件 DMEM(高糖)+10%FBS
传代方法 1:2~1:6传代;2~3天换液1次。
细胞生物学研究有以下几个方面。产品仅用于科学研究
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

实验报告:
一、分离与培养:
    1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
    3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
    5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、荧光鉴定:
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
    2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
    5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
    6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
小鼠可溶性 E- 选择素 (mouse sE-Selectin/ sCD62E)   作用:   ELISA   规格:   96T   美国 R&D     Glimepiride  93479-97-1  中文名:格列美脲  分子式:C24H34N4O5S 

小鼠颗粒酶elisa试剂盒   小鼠颗粒酶试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠颗粒酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠颗粒酶试剂盒、小鼠颗粒酶elisa试剂盒   保存条件:2-8℃
氯化飞燕草素,O二葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg 小鼠细胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA试剂盒 ,英文名: CK 18-M30 ELISA Kit

氯化失车菊素,O双葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg 小鼠碱性0酸酶(ALP)ELISA检测试剂盒Mousealkalinephosphatase,ALPELISAKit 96T/48T

二氢葫芦素B HPLC≥95% 20mg 人核糖体合成蛋白NSA2同源物(NSA2)试剂盒 Human NSA2 ELISA Kit

葫芦素B OBetaD葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISAKit大鼠脱氢表雄同S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒规格:96T/48T

甲基新苦木素 HPLC≥95% 20mg 30%ACRYLAMIDE-BIS(29:1)溶液500毫升

,二去氢隐丹参酮 HPLC≥95% 20mg MouseEndomeiumAibody,EMAbELISA试剂盒小鼠抗内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T

丹参二醇A HPLC≥95% 20mg 小鼠细胞间粘附分子5(ICAM5)ELISA试剂盒 ,英文名: ICAM5 ELISA Kit

丹参二醇B HPLC≥95% 20mg 兔子白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒RabbitIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T

丹参二醇C HPLC≥95% 20mg 牛血清白蛋白(ALB)试剂盒 Bovine Serum albumin,ALB ELISA kit

丹参酸甲酯 HPLC≥95% 20mg 英文名称HumanaicardiacmuscleaibodyELISAKit人抗心肌抗体(CMA)规格:96T/48T
MDCK(NBL-2)细胞霍乱弧菌(O1)单重荧光PCR检测试剂盒48Testosterone propionate575

霍乱弧菌霍乱基因(ctxA)单重荧光PCR检测试剂盒48Testosterone enanthate3157庚酸

霍乱弧菌共调菌毛亚单位基因(tcpA)单重荧光PCR检测试剂盒48Testosterone582

嗜水气单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒48Stanolone5218雄诺龙

类致贺邻单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒48Androstenedione1963/5/8雄烯二酮


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