产品名称：BRL细胞

产品详细 大鼠肝细胞；BRL
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM(高糖）+10%FBS
传代方法 消化CQ-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞生物学研究有以下几个方面。产品仅用于科学研究
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
小鼠癌标志物CA125ELISAKit     Brinzolamide  138890-62-7  中文名：布林佐胺  分子式：C12H21N3O5S3  度：98.0%  关键词： 

小鼠阿立新A(OrexinA)ELISA试剂盒     Bortezomib  179324-69-7  中文名：硼替佐米  分子式：C19H25BN4O4  度：98.0%   

小鼠γ基(GABA)ELISA试剂盒              Boldenone undecylenate  中文名：宝丹酮十一烯酸酯
氟达拉宾(标准品)  Fludarabine  质量规格：HPLC≥98%,标准品 MouseIerleukin9,IL-9ELISA试剂盒小鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T

G-418 硫酸盐  G-418 disulfate,Geneticin  质量规格：>500U/mg,BR 小鼠神经丝蛋白L(NF-L)ELISA试剂盒 ，英文名： NF-L ELISA Kit

埃罗替尼  Erlotinib  质量规格：>99%,BR,细胞培养级 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA检测试剂盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 96T/48T

N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)  N-Acetyl-cysteine  质量规格：>98%,BR 人甘油二酯(DAG)试剂盒 Human diacylglycerol,DAG ELISA kit

佐匹克隆    质量规格：>98.5%,BP2009,BR RatImmunoglobulinG,IgGELISAKit大鼠球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

佐匹克隆(标准品)    质量规格：HPLC>99%,标准品 BrdU标记法细胞繁殖比色法定量检测试剂盒10/50

阿尼西坦，回拉西坦;茴拉西坦  Aniracetam  质量规格：≥99%,BR MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISA试剂盒小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒规格：96T/48T

阿尼西坦(标准品)  Aniracetam  质量规格：>98%,标准品 小鼠神经丝蛋白(NF)ELISA试剂盒 ，英文名： NF ELISA Kit

L-谷氨酰胺  L-Glutamine  质量规格：>99%,BR 小鼠血管**素受体Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA检测试剂盒Mouseangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T

罗氟司特  Roflumilast  质量规格：含量≥99.0%(HPLC) 人甘露糖受体(MR)试剂盒 Human mannose receptor,MR ELISA Kit
N6-异戊烯基腺嘌呤溶液（2ip）5×1ml2''-O-Acetylsprengerinin C1273

Neomycin solution 新霉素溶液5×1ml2-n-Propyl-methyl-(1-methylbenzimidazole-yl)benzimidazole1526282

Penicillin G Na Solution 青霉素G钠盐溶液 mg/ml5×1ml 2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate1587352-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯

Penicillin-Streptomycin Solution 0×青链霉素溶液0ml2-Methylsulfanylpyrimidin(3H)-one575

Penicillin-Streptomycin Solution 青链霉素溶液(0×)0ml2-Methylanthraquinone8442-甲基蒽醌
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.BRL细胞研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。