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  • 产品名称:RBL-2H3细胞

  • 产品型号: BH-0109871
  • 产品**:派瑞曼
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简单介绍:
RBL-2H3细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
详情介绍:

产品名称

RBL-2H3细胞

规格

T25

货号

BH-0109871

产品详细 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞
形态特性 成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 RBL-2H3是1978年国立牙科研究所的学实验室从Wistar大鼠保持肿瘤状态的嗜碱性细胞中分离和克隆出来的嗜碱性白血病细胞株。 这些细胞具有高亲和力的IgE受体。 通过集聚这些受体或与钙离子载体协同作用可以激活它们分泌组胺及其他递质。 这株细胞广泛地用于研究肥大细胞FCA-RI和分泌的生化途径。 RBL-2H3细胞是研究FCA-RI结构的模型。 它们广泛地用于研究细胞分泌的不同方面,包括细胞内钙浓度改变、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。 虽然几乎所有批号的FBS都支持细胞的生长,但在某些批号中
培养条件 Eagle's Minimum Essential Medium+15%FBS
传代方法 消化CQ-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞生物学研究有以下几个方面。产品仅用于科学研究
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

实验报告:
一、分离与培养:
    1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
    3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
    5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、荧光鉴定:
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
    2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
    5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
    6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISAKIT     6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  36450-01-8  中文名:  分子式:C29H46O2  度:%  关键词:  豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒     6-Hydroxyrubiadin  87686-86-0  中文名:6-羟基甲基异茜草素  分子式:C15H10O5  度:97.5%  关键词:  抗氧化; 中药对照
Celite硅藻土,酸洗(用于总膳食纤维含量分析,TDF-100A)  Celite, acid-washed  质量规格:用于总膳食纤维含量分析,TDF-100A Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISA试剂盒人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒规格:96T/48T

Celite® 硅藻土545(助滤剂,通量煅烧(filter aid,flux calcined))  Celite® 545  质量规格:助滤剂,通量煅烧(filter aid,flux calcined) 脂质过氧化物异构前列腺素(ISOPROSTANE)高效液相色谱(HPLC)分析试剂盒20

氯己定(标准品)  Chlorhexidine  质量规格:分析标准品,99.5% MouseAmylinELISAKit小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T

香茅醇(分析标准品,≥99.0%(GC))   β-Citronellol  质量规格:分析标准品,≥99.0%(GC) 小鼠0脂肌醇3激酶(PI3-K)ELISA试剂盒 ,英文名: PI3-K ELISA Kit

多菌灵标准溶液(100μg/ml,u=3%)  Carbendazim solution  质量规格:100μg/ml,u=3% 大鼠促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒ratfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T

多菌灵标准溶液(10μg/ml,u=3%)  Carbendazim solution  质量规格:10μg/ml,u=3% 人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)试剂盒 Human BIRC4 ELISA kit

屈(标准品)  Chrysene  质量规格:分析标准品 RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒规格:96T/48T

(标准品)  Carbaryl  质量规格:分析标准品,>99.5%(HPLC) D-乳酸待测样品处理试剂盒20

毒死蜱(标准品)  Chlorpyrifos  质量规格:分析标准品,99% MouseProteinPhosphatase,PPELISA试剂盒小鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒规格:96T/48T

灭蝇胺标准溶液(10μg/ml,u=2%)  Cyromazin solution  质量规格:10μg/ml,u=2% 小鼠0酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒 ,英文名: cAMP ELISA Kit
人碳酸酐酶Ⅲ(CA3)酶联吸附测定试剂盒 别称:CAⅢ, CA-Ⅲ, Car3 Human CA3(Carbonic Anhydrase Ⅲ, Muscle Specific) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组CA3浓度
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
RBL-2H3细胞4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等; 
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。


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