产品名称：Okul BclxL C3细胞

产品详细 B细胞
形态特性 母细胞
生长特性 悬浮生长
特征特性
培养条件
传代方法 1:2传代
细胞生物学研究有以下几个方面。产品仅用于科学研究
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
Glaraldehydesolion   500ml  Anthraquinone  84-65-1  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2 

Glaraldehydesolion   500ml                 Anthraglycoside B  中文名：大黄素-8-O-葡萄糖苷  分子式：C21H20O10 

G-418素   1g  4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone  中文名：四乙基米氏酮  分子式：C21H28N2O  度：98.0%

G
氨基三乙酸（标准品）  Nitrilotriacetic acid  质量规格：供HPLC法杂质检查用 ELISAKitCyclin-D3人细胞周期素D3规格：48T/96T

1，3-（标准品）  1,3- Propylene Glycol  质量规格：供检查用 小鼠甘酸脱氢酶(GLDC)ELISA试剂盒 ，英文名： GLDC ELISA Kit

二甘醇（标准品）  Diethylene Glycol  质量规格：供检查用 人碱性胎儿蛋白(BFP)ELISA检测试剂盒Humanbasicfetoprotein,BFPELISAKit 96T/48T

氯噻嗪（标准品）  Chlorothiazide  质量规格：供HPLC法系统适用性试验用 大鼠状腺原氨酸(T3)试剂盒 Rat i-iodothyronine,T3 ELISA Kit

盐酸阿米洛利杂质（4-氨基-6-氯-1，3-苯基二硫酰胺）（标准品）  4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide  质量规格：供检查用 英文名称RatthrombieceptorELISAKit大鼠凝血酶受体()规格：96T/48T

盐酸地芬尼多杂质（烯化合物)（标准品）  Alkene  质量规格：供检查用 活体组织线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒10

N-甲基帕罗西汀（标准品）  N-Methylparoxetine  质量规格：供检查用 ELISAKitMEPE人细胞外基质0酸糖蛋白规格：48T/96T

七氟烷（标准品）  Sevoflurane  质量规格：供GC法检查用 小鼠甘露糖受体C2(MRC2)ELISA试剂盒 ，英文名： MRC2 ELISA Kit

二甲氧苄啶（标准品）  Diaveridine  质量规格：检查 人副甲状旁腺相关肽(PTHrp)ELISA检测试剂盒Humanparathyroidhormonerelatedpeptide,PTHrpELISAKit 96T/48T

美雄诺龙（标准品）  Mestanolone  质量规格：供HPLC法系统适用性试验用 大鼠山梨醇脱氢酶(SDH)试剂盒 Rat sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit
人水通道蛋白1(AQP-1)酶联吸附测定试剂盒 别称:AQP1, AQP-CHIP, CHIP28, CO Human AQP-1(Aquaporin 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组AQP-1浓度
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.Okul BclxL C3细胞研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。