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菌种的培养:
1、是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。产品仅用于科研
产品名称:库氏棒杆菌
编号:BH-J011434
拉丁文:Corynebacterium kutscheri
分离基物: 老鼠的肺
提供形式: 冻干粉
**等级: 1
模式菌株: no
培养基: 营养肉汁培养基 :牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 20.0g(液体培养基不含),蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min。[注]培养芽孢杆菌时加入5mgMnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。
生长条件: 37℃,好氧,18-24h
存储条件: 2-8℃
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围广的微生物保存法。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为种子,把种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二库氏棒杆菌级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
公司专业代理ATCC菌种,价格优惠,质量保证,为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。
α-酮戊二酸(标准品)
2-Ketoglutaric acid 质量规格:>98%,标准品 人主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA检测试剂盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/HLAⅠELISAKit
96T/48T
α-酮戊二酸 2-Ketoglutaric acid 质量规格:>99%,BR 人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA检测试剂盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit
96T/48T
卡博替尼 ;XL184
Cabozantinib(BMS907351) 质量规格:>99%,广谱酪氨酸激酶抑制剂 人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA检测试剂盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISAKit
96T/48T
D-丝氨酸乙酯盐酸盐 H-D-SER-OET
HCL 质量规格:>98% 人转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA检测试剂盒Humanansferrieceptor,TFRELISAKit 96T/48T
马来酸阿森那平
Asenapine Maleate 质量规格:>99% 人转移因子(TF)ELISA检测试剂盒Humanansferfactor,TFELISAKit
96T/48T
三苯甲基坎地沙坦西来替昔酯
Trityl candesartan cilexetil 质量规格:>99% 人组织蛋白酶D(cath-D)ELISA检测试剂盒HumancathepsinD,cath-DELISAKit 96T/48T
他莫昔芬
Tamoxifen 质量规格:>99%,BR 人组织多肽特异性抗原(TPS)ELISA检测试剂盒Humaissuepolypeptidespecificaigen,TPSELISAKit 96T/48T
头孢替安盐酸盐
Cefotiam 质量规格:>800 µg/mg,USP 山羊γ干扰素(IFN-γ)ELISA检测试剂盒GoatIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
头孢替安盐酸盐(标准品) Cefotiam 质量规格:效价测定 山羊白介素10(IL-10)ELISA检测试剂盒GoatIerleukin10,IL-10ELISAKit 96T/48T
络塞定(标准品)
(2E,4S)-4-Hydroxy-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-yl
beta-D-glucopyranoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 山羊白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒GoatIerleukin2,IL-2ELISAKit
96T/48T
1201902-80-8 MLN9708
50mg Schistosoma incognitum不明血吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度
1201902-80-8 MLN9708
5mg Schistosoma japonicum日本血吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度
1201913-82-7 Tofogliflozin hydrate (CSG-452 hydrate) 10mg
Schistosoma bovis牛血吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度
1201913-82-7 Tofogliflozin hydrate (CSG-452 hydrate) 10mM*1mLinDMSO Schistosoma curassoni柯拉松血吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度
1201913-82-7 Tofogliflozin hydrate (CSG-452 hydrate) 2mg
Schistosoma curassoni柯拉松血吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度
PAH-Mix 158,10ng/ul 标准品 4-Chloro-2-methylphenol - 10ng/ul于乙腈,1ml
PAH-Mix 77 标准品 4-Chloro-2-methylaniline - 10ng/ul于甲苯/正己烷,1ml
PAH-Mix 27 标准品 Chloromethane - 溶于乙腈,1ml