产品名称：Anti-Nebulette抗体

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别    名  Actin binding Z disk protein; bA56H7.1; LIM nebulette; LNEBL; NEBL; NEBL_HUMAN.
英文名称  Anti-Nebulette抗体
中文名称　肌动蛋白结合蛋白Z盘状蛋白抗体 
浓    度  1mg/1ml
规 格  0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit  
克隆类型  polyclonal
交叉反应   Human, Mouse, Rat
产品类型  一抗    
研究领域   心血管 信号转导 结合蛋白 细胞骨架 
蛋白分子量  predicted molecular weight: 116kDa
性    状  Lyophilized or Liquid
免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human Nebulette
亚    型  IgG
纯化方法  affinity purified by Protein A
储 存 液  Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500

单抗原理：
抗体主要由B细胞合成。每个B细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B细胞系，含遗传基因不同的B细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成多克隆，并合成多种抗体。如果能选出一个**一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。
单抗制备过程：
1.提取合成专一性抗体的单个B细胞（不能在体外生长）。
2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B细胞融合，得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养，选出所需要的细胞群，并进行克隆化培养，得到稳定的杂交瘤细胞，再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯，一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A－琼脂糖4B亲和层析法。
实验原理 :
（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
（3）结合细胞：不同类别的球蛋白，可结合不同种的细胞，参与应答。
（4）可通过胎盘及粘膜：球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
球蛋白A（IgA）可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染的主要因素。
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生应答的性能。不同的蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。

抗体分子标记技术：
（一）原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所**的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
（二）准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；
2.仪器
凝胶过滤柱；￥-记数器；玻璃纤维滤。
（三）操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；
2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

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