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单抗原理:
抗体主要由B细胞合成。每个B细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B细胞系,含遗传基因不同的B细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成多克隆,并合成多种抗体。如果能选出一个**一种专一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。
别 名 PXN(phospho S178); Paxillin
(phospho S178); Paxillin (phospho Ser178); p-Paxillin (Ser178); Paired box
protein Pax 1; PAX 1; PAX1; Paxillin alpha; PXN; PXN protein; FLJ16691;
FLJ23042; FLJ16691; PAXI_HUMAN; Paxillin; PXN protein.
英文名称 Anti-Phospho-Paxillin(Ser178)抗体
中文名称 磷酸化桩蛋白Paxillin抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human,
Mouse, Rat
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 学 转录调节因子
激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted
molecular weight: 65kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH
conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Paxillin around the
phosphorylation site of Ser178
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS,
pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500
ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
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实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,参与应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生应答的性能。不同的蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所**的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
3,3',4,4'-Benzophenone
tetracarboxylic dianhydride
2421-28-5 中文名:3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐 分子式:C17H6O7 神经营养素3 英文名称:
Neuroophin-3 规格: 48T/96T 英文缩写:
-3
1,2-Benzisothiazolin-3-one 2634-33-5
中文名:1,2-苯并异噻唑-3-酮 分子式:C7H5NOS 上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒
Benzoin
methyl ether 3524-62-7 中文名:安息香甲基醚 分子式:C15H14O2 神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒
Benzanthrone
L-(+)-Arginine 74-79-3
中文名:L-(+)-精氨酸 分子式:C6H14N4O2 脑素/脑尿肽(BNP)ELISA试剂盒
1-甲基萘
1-(Bromomethyl)naphthalene 质量规格:>99% ELISAKitHB-β人血红蛋白β亚基规格:48T/96T
R-联萘酚酯 (R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl
hydrogenphosphate 质量规格:>99% 小鼠黑色素瘤(Melanoma)ELISA试剂盒 ,英文名: Melanoma ELISA Kit
2,6-二氯嘌呤
2,6-Dichloropurine 质量规格:>97%,原装进口 大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 96T/48T
2,4-二氯喹唑啉
2,4-Dichloroquinazoline 质量规格:>98% 人并殖吸虫抗体(IgM)试剂盒 Human Ai-Paragonimus aibody IgM ELISA
kit
9-氯甲基蒽
9-(Chloromethyl)anthracene 质量规格:>98%,进口原装 RatoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
阿魏酸乙酯(标准品)
Ethyl ferulate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Michel固着液50毫升
CAPS; 3-(环已胺)丙磺酸
CAPS 质量规格:>99% PorcineEpithelialgrowthfactor,EGFELISA试剂盒猪表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
巴豆苷(标准品)
Crotonoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠核转录因子kBP65(NFkBP65)ELISA试剂盒 ,英文名: NFkBP65 ELISA Kit
巴西苏木素(标准品)
Brazilin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA检测试剂盒RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 96T/48T
菝葜皂苷元(标准品)
Sarsasapogenin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人并殖吸虫抗体(IgG)试剂盒 Human Ai-Paragonimus aibody IgG ELISA
kit
人生长分化因子15(GDF15)酶联吸附测定试剂盒 别称:GDF-15, MIC-1, MIC1, NAG-1, PDF, PLAB,
PTGFB, TGF-PL Human GDF15(Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组GDF15浓度
a,a,a-4-四氯甲苯 标准品 a,a,a-4-Tetrachlorotoluene 5216-25-1 纯品型,1g 特征形态 固态
2-氯三氯甲苯 标准品 Terbuthylazine-desethyl 2136-89-2 纯品型,0.25G 特征形态 固态
2,3,5,6-四氯吡啶 标准品 TerbuthylazineD5(ethylD5) 2402-79-1 纯品型,0.1G 特征形态 固态
Anti-Phospho-Paxillin(Ser178)抗体单抗制备过程:
1.提取合成专一性抗体的单个B细胞(不能在体外生长)。
2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B细胞融合,得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养,选出所需要的细胞群,并进行克隆化培养,得到稳定的杂交瘤细胞,再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯,一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A-琼脂糖4B亲和层析法。