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单抗原理:
抗体主要由B细胞合成。每个B细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B细胞系,含遗传基因不同的B细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成多克隆,并合成多种抗体。如果能选出一个**一种专一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。
别 名 Erythrocyte 65 kDa protein; HSAN2;
HSN2; hWNK1; KDP; KIAA0344; Kinase deficient protein; MGC163339; MGC163341;
p65; PRKWNK1; Prostate derived sterile 20 like kinase; Protein kinase lysine
deficient 1; Protein kinase lysine-deficient 1; Protein kinase with no lysine
1; PSK; Serine/threonine protein kinase WNK1; Serine/threonine-protein kinase
WNK1; With no K; WNK lysine deficient protein kinase 1; WNK1; WNK1_HUMAN.
英文名称 Anti-Phospho-WNK1(Thr60)抗体
中文名称 磷酸化赖氨酸缺陷型蛋白激酶1抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human,
Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 细胞生物 信号转导
激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted
molecular weight: 251kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH
conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human WNK1 around the phosphorylation
site of Thr60
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS,
pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500
ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
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实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的球蛋白,可结合不同种的细胞,参与应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生应答的性能。不同的蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所**的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
猪(HYD)ELISA试剂盒
Soyacerebroside I 中文名: 分子式:C40H75NO9
猪(HYD)ELISAKit Testosterone decanoate 中文名:癸酸 分子式:C29H46O3 度:98.0%
中性转化酶(NI)测试盒
可见分光光度法 50管/24样 Withanolide S 63139-16-2
中文名:醉茄内酯S 分子式:C28H40O8
中性酯酶染液
H-E dye
4,4'-Diaminodiphenylsulfone
80-08-0 中文名:4,4'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S
中性木聚糖酶测试盒
可见分光光度法 50管/24样
Testosterone enanthate 中文名:庚酸 分子式:C26H40O3 度:98.0%
tlrl-vav70n
VACV-70 Naked 200 µg
tlrl-ydna G3-YSD
200 µg
tlrl-ydnac G3-YSD Control 200 µg
tlrl-pgcn Poly(dG:dC) naked 200 µg
tlrl-3prnaclv 5'ppp-dsRNA Control / LyoVec™ 25 µg
Humanpituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
19-Nortestosterone acetate 中文名:19-去甲乙酸盐 分子式:C20H28O3
Humanpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
18-Hydroxytritriacontan-16-one
97191-42-9 中文名: 分子式:C33H66O2
HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒规格:96T/48T 17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one 中文名:17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮 分子式:C26H30O3
HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒规格:96T/48T 17α-Thevebioside
114613-59-1 中文名: 分子式:C36H56O13
HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit人0酸化乙酰辅酶A(PaCoA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 17α-Estradiol 中文名:17α-雌二醇 分子式:C18H24O2
邻苯二甲酸二乙酯-d4 标准品 Phthalicacid,bis-ethylesterD4 9
邻苯二甲酸二乙酯(DEP) 标准品 Phthalicacid,bis-ethylester 84-66-2 纯品型,0.5g 特征形态 固态
邻苯二甲酸双-2-乙氧基乙酯-D4 标准品 PBBNo.103 1398066-12-0 纯品型,25mg 特征形态 固态
Anti-Phospho-WNK1(Thr60)抗体单抗制备过程:
1.提取合成专一性抗体的单个B细胞(不能在体外生长)。
2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B细胞融合,得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养,选出所需要的细胞群,并进行克隆化培养,得到稳定的杂交瘤细胞,再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯,一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A-琼脂糖4B亲和层析法。