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稳定细胞株筛选步骤

日期:2025-04-28 16:47
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摘要: 稳定细胞株筛选步骤: 1.构建携带目标基因的载体 首先,需要将目标基因克隆到携带有选择标记的载体中,例如含有抗生 素抗性基因的质粒。然后将该载体转染到目标细胞中。 2.选择标记筛选 转染后的细胞需要在含有抗生 素的培养基中进行筛选。只有成功转染的细胞才能够在含有抗生 素的培养基中生长。 3.稳定细胞株的筛选 在完成了选择标记筛选后,需要对细胞进行进一步的筛选,以得到稳定的细胞株。这可以通过对细胞进行单克隆分离来实现。具体地,将转染后的细胞在...

稳定细胞株筛选步骤:

1.构建携带目标基因的载体

首先,需要将目标基因克隆到携带有选择标记的载体中,例如含有抗生 素抗性基因的质粒。然后将该载体转染到目标细胞中。


2.选择标记筛选

转染后的细胞需要在含有抗生 素的培养基中进行筛选。只有成功转染的细胞才能够在含有抗生 素的培养基中生长。


3.稳定细胞株的筛选

在完成了选择标记筛选后,需要对细胞进行进一步的筛选,以得到稳定的细胞株。这可以通过对细胞进行单克隆分离来实现。具体地,将转染后的细胞在96孔板中进行单克隆分离,每个孔只保留一个细胞。然后,通过检测细胞株的表达水平和稳定性,筛选出较佳的稳定细胞株。